当往某些溶液中加入一定量的酸和碱，或加少量水稀释时，这类溶液的pH值基本保持不变，我们称这样的溶液叫做缓冲溶液。其在生物化学的研究工作中有着极为重要的意义。

下面我们就以Tris缓冲液为例，来谈谈Tris缓冲液的相关知识。

Tris缓冲液的优点

① 因为Tris碱的碱性较强，所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液;

② 对生物化学过程干扰很小，不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。

Tris缓冲液的缺点

① 缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大，缓冲液稀释十倍，pH值的变化大于0.1;

② 温度效应大，温度变化对缓冲液pH值的影响很大，△pKa/℃=-0.031，例如:4℃时缓冲液的pH=8.4，则37℃时的pH=7.4，所以一定要在使用温度下进行配制，室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃~4℃;

③ 易吸收空气中的CO2，所以配制的缓冲液要盖严密封;

④ 此缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用，所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。

Tris缓冲液pH范围

Tris缓冲液在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂，它的常用有效pH范围是在“中性”范围，如:

Tris缓冲液:pH=7.5~9

Tris-HCl缓冲液:pH=7.5~8.5

Tris-磷酸盐缓冲液:pH=5.0~9.0

Tris缓冲液的配置方法

某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制:将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与上表所示相应体积(单位:ml)的0.1ml/L HCl混合，加水将体积调至100ml。

Tris-HCl缓冲液的两种配置方法

分别配制0.05 mol/L Tris和0.05 mol/L HCl溶液，然后按常用表中所列体积混合即可。

但是由于标准浓度的稀盐酸不易配制，所以常用另一种方法:以配置1 L 0.1 mol/L的Tris-HCl缓冲液为例:先称12.11 g Tris碱溶于950 mL~970 mL 去离子水中，边搅拌边滴加4 N HCl，用pH计测定溶液pH值至所需的pH值，然后再加水补足到1 L。

Tris缓冲溶液的应用

在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系稳定pH值;在凝胶中使用Tris-HCl缓冲体系稳定pH值;被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂;Tris缓冲液的低离子强度特点还可用于线虫的中间纤维的形成;在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”，可用于DNA的稳定和存储;将调节pH值的酸溶液换成乙酸，获得“TAE缓冲液”，换成硼酸可获得TBE缓冲液。这两种缓冲液常用于核酸电泳实验中。

除了Tris-HCl之外，Tris还有多种衍生缓冲液:

TBS=Tris-HCl+ NaCl+KCl，常用于清洗免疫染色的组织或Western Blotting中的蛋白印迹膜等;

TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20，做Western Blotting中常用的一种洗膜缓冲液;

TE=Tris-HCl+EDTA，对DNA的碱基有保护性，常被用于DNA的稳定和储存;

TAE=Tris base+乙酸+EDTA，是大片段DNA短时间电泳时广泛使用的缓冲系统;

TBE=Trisbase+硼酸+EDTA，适用于长时间DNA电泳，对较小片段分离效果较好。

来源：快资讯